300余種。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇_定。以20個(gè)堿基左右引物為例：常規(guī)PCR擴(kuò)增，可選擇5 nmol（約合1 OD），可做200次50 μl標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)；基因拼接或退火后做連接，可選擇5 nmol（約合1 OD）。

(1) 干燥制品很穩(wěn)定，常溫下數(shù)個(gè)月無(wú)問(wèn)題。但為保證萬(wàn)無(wú)一失，放置于-20℃保存為好。

(2) 溶解后的溶液DNA短期內(nèi)（1-2周）使用可放置在4℃下保存，長(zhǎng)期保存請(qǐng)放置于-20℃。避免反復(fù)凍融,液體可分裝成多份保存。（溶解DNA時(shí)，請(qǐng)注意使用無(wú)菌、無(wú)核酸酶的水或TE Buffer）。

(3) 熒光標(biāo)記引物請(qǐng)避光保存。

用紫外分光光度計(jì)在260 nm波長(zhǎng)測(cè)定溶液的吸光度來(lái)定量，測(cè)定時(shí)溶液的吸光度最好稀釋到0.2-0.8之間(吸光度太高或太低會(huì)有較大的誤差)。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后，取部分溶液稀釋到1 ml并在1 ml標(biāo)準(zhǔn)比色皿中測(cè)定其吸光度，即為所測(cè)體積的OD值，進(jìn)而可以計(jì)算出母液的OD值。

泓迅發(fā)貨的Oligo產(chǎn)品，發(fā)貨管標(biāo)簽及COA報(bào)告均已定量，且已給出建議加水量，以方便客戶實(shí)驗(yàn)，可以直接參照?qǐng)?bào)告數(shù)值，計(jì)算獲得濃度等各參數(shù)。

(1) 引物和模板是否配對(duì)，檢查引物3’端15bp堿基是否與模板序列完全匹配；

(2) 引物本身是否有發(fā)夾結(jié)構(gòu)或高GC,poly結(jié)構(gòu)等；

(3) PCR反應(yīng)試劑或PCR儀是否能正常工作；

(4) PCR反應(yīng)條件是否合適；

(5) 對(duì)照是否正常擴(kuò)增。

-80度至少保存1年，干粉

溶解后分裝1管至少保存半年

主要因?yàn)槭切揎梿误w穩(wěn)定性較差，偶聯(lián)時(shí)間長(zhǎng)，效率低，最后得到的產(chǎn)量自然低于一般的引物。修飾引物通常需要PAGE或HPLC純化，純化過(guò)程損失大。修飾引物使用的原料是一般引物原料的幾百倍，所以產(chǎn)品的價(jià)格自然高。

有些熒光基團(tuán)在260 nm處也有吸收光，例如 FAM, HEX, TAMRA, TET。其它在260 nm處可能也有吸收值，但是數(shù)據(jù)沒有公布，因此計(jì)算時(shí)不包括在里面。

5'磷酸化作用是通過(guò)B-氰乙基化學(xué)反應(yīng)添加到引物5'端的糖環(huán)上，而不是最后一個(gè)堿基上；3'磷酸鹽被連接到固體支持介質(zhì)上，所以在合成的第一個(gè)循環(huán)，堿基就與它偶聯(lián)。3'磷酸化修飾具有阻止聚合酶延伸的功能。

5'Aminolinker(C6)是在合成循環(huán)的最后一步以亞磷酸胺的形式通過(guò)B-氰乙基化學(xué)反應(yīng)添加到引物5'糖環(huán)上的，而不是添加到最后一個(gè)堿基上。

5'氨基標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)效率是>95%,氨基基團(tuán)在260nm處是沒有吸光值的；它在210nm處有吸光值。不能通過(guò)電泳檢測(cè)它的存在（瓊脂糖或丙烯酰胺）。

3'Aminolinker(C7)只與一些5'修飾兼容，如FAM, HEX, TET, Fluorescein, Biotin, Amine, and phosphate。其它的5'修飾(如Alexa dyes)需要氨基才能與寡核苷酸相連，這就無(wú)法避免該染料與3'氨基相連。

氨基修飾是很簡(jiǎn)單便宜的方法。任意一種氨基修飾都可以。5'末端C6類型效果很好。

發(fā)貨形式默認(rèn)1mg/管發(fā)貨，不分裝。客戶收到后可以溶解分裝冷凍，一次取用一管。

ddH2和生理鹽水